Centrífugas Biocen 22 R y Bioprocen 22 R en el proceso de diagnóstico del Covid-19
El virus Covid-19, denominado por la OMS como SARS-Cov-2, pertenece al género betavirus y es un virus RNA monocatenario positivo. Ambas propiedades le permiten que presente altas tasas de mutación, porque carece de mecanismos reparadores del tipo DNA polimerasas. Es de muy rápida transmisión y ha sido considerado por la OMS como el causante de la pandemia de 2020.
Una particularidad de este virus es que puede transmitirse incluso en el periodo de incubación, cuando el individuo está asintomático. Por lo tanto, es crucial la detección de personas infectadas por el Covid-19 para proceder a su aislamiento y ofrecer el soporte médico que corresponda según la sintomatología que presente el paciente en ese momento.
MÉTODOS ACTUALES DE DETECCIÓN
En estos momentos se disponen de dos tipos de procesos:
- rt-PCR: Persigue en la detección de genes virales como el RdRp, el gen E y el gen N. Es capaz de detectar el virus en una muestra aún con baja carga viral y, por lo tanto, en etapas tempranas.
- Se realizan en el laboratorio mediante técnicas de análisis genético.
- Este método supone una inversión mayor en cuanto a tiempo, porque puede llegar a tardar 3 ó 4 horas.
2. Kit de detección rápidos:
• Óptimos para la detección de positivos.
• Los negativos ante una historia clínica evidente, tienen que ser confirmados por rt-PCR.
• Obtiene resultados en 15 min.
Actualmente la rt-PCR es el método de referencia por su alta sensibilidad
¿QUÉ REQUISITOS SON NECESARIOS PARA UNA DETECCIÓN FIABLE?
- Personal cualificado: En procesos de extracción y amplificación de RNA.
- Equipos: Ultracongeladores – 80º C, centrifugas, termocicladores (precisos en Tº y RPM), Micropipetas.
- Materiales: Micropipetas, microtubos y puntas de pipeta (libres de RNasas), material fungible, etc.
- Componentes de extracción y amplificación del material genético: primers, oligonucleótidos, etc.
- Tanto equipos, materiales, insumos, deben de asegurar NO interferir con el análisis. Por tanto deben ser: precisos y de fácil desinfección.
- En caso de contaminación durante el proceso: desinfectar con una mezcla de 70% etanol y 0,5 % hipoclorito sódico entre 10 y 30 min.
Centrífugas de alta velocidad que cumplen con todos los requisitos. -Pantallas LCD:
* Programar con precisión
* Visualizar (RPM, FCR y temperatura), durante todo el proceso.
- Fácil desinfección:
* Rotores de aluminio.
* Cámara de centrifugación.
* Cuerpo exterior de los equipos de acero inoxidable.
PUNTOS CLAVE EN LA DETECCIÓN
• Asegurar que la toma de muestras se ha realizado correctamente. • Transportar y mantener la muestra siguiendo las instrucciones del kit de toma de muestras. • En caso de no poder procesar la muestra inmediatamente, almacenar a -80ºC. • Durante el proceso de extracción del RNA no marcar los tubos cuando la lectura del resultado se vaya a realizar por fluorescencia.
Ambos equipos, refrigerados, cuentan con rotores para tubos PCR: Alcanzan altas velocidades (hasta 18.100 RPM en el caso de la Biocen 22 R.)
• Comprobar que la centrífuga ofrece una FCR suficiente para arrastrar los restos celulares al fondo del tubo y evitar interferencias. La centrífuga tiene que ser preferentemente refrigerada para evitar la desnaturalización del RNA viral. • Para evitar contaminaciones cruzadas recordar siempre hacer controles negativos. • Utilizar termocicladores calibrados que le aseguren mantener la temperatura de trabajo, especialmente en el rango de temperatura entre 30 y 45ºC. • Los microtubos y puntas de pipeta que se utilicen deben ser del tipo de «libre de RNasas». Asegurarse de que los tubos están bien cerrados al alojarlos en el interior de la centrífuga o del termociclador.
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